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CUTANA pAG-MNase for ChIC/CUT RUN Workflows

更新時間:2024-03-22

簡要描述:

CUTANATM pAG-MNase是進行染色質免疫切割(ChIC)和核酸酶靶向切割和釋放(CUT&RUN)的關鍵試劑。作為蛋白A/G與微球菌核酸酶的融合表達產物,CUTANA pAGMNase與來自各種物種宿主的靶抗體兼容,并且經過高度純化以去除污染的E. coli DNA,這可能會使細胞數(shù)量少的樣本分析復雜化。與ChIP-seq相比,pAG-MNase可以在ChIC/CUT&RUN中有效地繪制

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CUTANATM pAG-MNase是進行染色質免疫切割(ChIC)和核酸酶靶向切割和釋放(CUT&RUN)的關鍵試劑。作為蛋白A/G與微球菌核酸酶的融合表達產物,CUTANA pAGMNase與來自各種物種宿主的靶抗體兼容,并且經過高度純化以去除污染的E. coli DNA,這可能會使細胞數(shù)量少的樣本分析復雜化。與ChIP-seq相比,pAG-MNase可以在ChIC/CUT&RUN中有效地繪制染色質特征,可以顯著改善信噪比和測序深度。


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FIGURE 1:

CUT&RUN gene browser tracks. CUT&RUN was performed as described above. Data verifies low non-specific MNase digestion with the absence of peaks in the IgG track, an expected H3K4me3 profile with sharp promoter peaks, and broad peaks in heterochromatin regions consistent with H3K27me3. Image was generated using the Integrative Genomics Viewer (IGV, Broad Institute).

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FIGURE 2:

Size distribution of released chromatin. CUT&RUN was performed as described above. Excised DNA is highly enriched for mononucleosomes (peaks at ~300 bp represent 150 bp nucleosomes + sequencing adapters).

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FIGURE 3:

CUT&RUN genome-wide heatmaps. CUT&RUN was performed as described above. Heatmaps show CUT&RUN signal aligned to annotated transcription start sites (TSS, +/- 2kb). High and low signal are ranked by intensity (top to bottom) and colored such that red indicates high localized enrichment and blue denotes background signal. Gene rows in each heatmap are aligned and sorted from high to low signal relative to H3K4me3 (middle).

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FIGURE 4:

Protein gel data. CUTANATM pAG-MNase (1 µg) was resolved via SDS-PAGE and stained with Coomassie blue. The migration and molecular weight of the protein standards are indicated.


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